抗原修復(fù)鍋是如何進(jìn)行工作的呢
抗原修復(fù)鍋是利用高壓鍋進(jìn)行抗原熱修復(fù)的技術(shù)。組織經(jīng)甲醛固定,甲醛的醛基與抗原蛋白的氨基交聯(lián),使決定簇的構(gòu)像改變,從而影響檢測(cè)蛋白表達(dá)。要充分暴露抗原決定簇,通經(jīng)常使用到抗原修復(fù)鍋??乖迯?fù)鍋適于甲醛固定的組織經(jīng)石蠟包埋落后行免疫染色前的處理,配合特別的抗原修復(fù)緩沖液確保得到高質(zhì)量的免疫染色效果。
抗原修復(fù)鍋特點(diǎn):
·一次可以在6中不同緩沖液中運(yùn)行,進(jìn)行抗原暴露;
·僅暴露抗原決定簇,不損傷組織的形態(tài);
·實(shí)驗(yàn)結(jié)果穩(wěn)定,抗原修復(fù)鍋結(jié)果重現(xiàn)性高;
·抗原修復(fù)鍋系列的玻片在獨(dú)立環(huán)境中經(jīng)過(guò)處理;
抗原修復(fù)鍋的修復(fù)方法的優(yōu)點(diǎn)是暴露抗原決定簇的效果較好,結(jié)果穩(wěn)定,受環(huán)境條件影響小(特別適合于高原地區(qū)),可重復(fù)性高,是一個(gè)理想的修復(fù)方法;但對(duì)于組織處理不佳的切片,容易脫片;同時(shí)用高pH值的抗原修復(fù)液會(huì)引起細(xì)胞核的碎裂和非特異性的增加,因此,高壓修復(fù)盡量避免使用高pH值的抗原修復(fù)液(EDTA、EGTA),建議采用pH6.0的檸檬酸抗原修復(fù)液。
抗原修復(fù)鍋的工作:
看上去,抗原修復(fù)鍋似我們烹飪的高壓鍋。這是一款功能*的“高壓鍋”,主要用于抗原暴露的工作,主要的工作原理也是裝玻片的幾個(gè)分室可以達(dá)到高溫(>120°C)高壓。靈敏的傳感控制器來(lái)保持一定的溫度和壓力及一定的時(shí)間,這些工作參數(shù)都是經(jīng)過(guò)嚴(yán)格的科學(xué)實(shí)驗(yàn)得到的數(shù)據(jù)。當(dāng)達(dá)到需要的溫度,抗原修復(fù)鍋會(huì)在該溫度下保持幾分鐘,之后鍋內(nèi)玻片被冷卻2個(gè)多小時(shí),特殊設(shè)材質(zhì)的內(nèi)鍋體控制了鍋和玻片的冷卻速度。